杂交瘤技术一般指B淋巴细胞杂交瘤技术。即利用细胞融合技术将免疫脾细胞与同源动物骨髓瘤细胞杂交，通过筛选获得分泌预定特异性抗体杂交细胞的实验技术。下面由莱德伯特（北京）生物科技有限公司为大家介绍一下杂交瘤技术。

1975年，两位学者Kohler和Milstein开发了基于细胞融合的技术。将体外培养的小鼠骨髓瘤细胞与羊红细胞（SRBC）免疫的小鼠脾细胞融合，建立分泌SRBC单克隆抗体的杂交瘤细胞系。结果表明，这些细胞可以在体外连续培养。它开创了抗体制备和应用的新纪元。

杂交瘤技术是一个周期长、连续性强的实验技术体系。实验主要包括动物免疫、骨髓瘤细胞和免疫脾细胞的制备、细胞融合、阳性杂交瘤的筛选、克隆培养、单克隆抗体的制备、纯化和鉴定。

根据Burnet抗体选择理论，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它的识别特异性抗原决定簇抗体，从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体，具有完全相同的分子结构和生物学特性，但B淋巴细胞分泌对体外长期存活有重要影响。

采用细胞融合技术，将B淋巴细胞与体外长期增殖的骨髓瘤细胞进行融合。通过选择性培养获得的杂交瘤细胞称为杂交瘤细胞。本工作不仅具有免疫B淋巴细胞分泌特异性mAb的功能，而且具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体。

肿瘤细胞的DNA生物合成有两条途径。首先是生物合成的主要途径，即从氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸，进而合成DNA。叶酸衍生物在核酸合成过程中对核苷酸的合成至关重要。氨基蝶呤是一种叶酸拮抗剂，阻断细胞内DNA生物合成的主要途径。

此时，如果培养基中含有核苷酸合成的中间产物次黄嘌呤和胸腺嘧啶，细胞的DNA合成可以通过另一种途径进行，即由次黄嘌呤和胸腺嘧啶（HGPRT）和TK催化的外源次黄嘌呤和胸腺嘧啶合成核苷酸。如果没有这些酶中的任何一种，这个途径就会被阻断。

未发生融合的骨髓瘤细胞及其同核融合体在HAT培养液中，其DNA合成的主要途径被A阻断后，由于缺乏HGPRT而不能利用培养液中的H。虽然TK可以使用T，但它不能完成完整DNA合成过程。未融合的脾细胞及其同核融合体在培养基中不能长时间生长，7天左右死亡。

脾细胞与骨髓瘤细胞（即杂交瘤细胞）的异核融合，不仅从脾细胞中获得HGPRT和TK，在培养基中利用H和T合成DNA，而且从骨髓瘤细胞中获得无限的增殖能力，使它们能在HAT培养基中存活。

单克隆抗体技术已成为免疫学中一项重要的常规技术，在细胞生物学、遗传学、微生物学、生物化学、肿瘤学等生命科学领域得到了广泛的应用。单克隆抗体引起的诊断学革命不再局限于科学研究。它将在临床治疗学和其他经济领域产生越来越重要的影响。目前Beacon这款仪器具备了单细胞光导系统通过整合光电定位技术和微流控技术，实现了在芯片的纳升级小室中，基于单个细胞的高通量细胞生物学研究，对单细胞克隆技术这方面有着重大的意义。

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