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Beacon对单克隆抗体的影响

发布时间:2021-09-28 14:56      浏览量:2157

传统的抗体制备方法是将抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。该方法制备的抗体不仅产率低,而且特异性差、纯度低、不敏感。

在动物免疫应答过程中,体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但每个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体。因此,为了获得大量的单个抗体,单个B淋巴细胞必须进行无性繁殖或克隆,形成一个细胞群,可以产生化学简单、高度特异的抗体。

抗原分子中能诱导抗体的位点和片段称之为抗原决定基。一个抗原分子上通常有许多抗原决定基,每个抗原决定基至少诱导一种抗体。所以在传统的抗血清中,有许多不同的抗体可以对抗这些不同的抗原决定基。

对于分子结构相似的抗原,由于它们含有共同或相似的抗原决定基,产生的抗血清会与这两种相似的抗原发生反应;因此,在检测这类抗原时,其特异性不是很理想,常为假阳性,又称交叉反应性。同时,由于个体免疫动物的体质不同,对抗原的反应也有很大差异,因此无法准确控制每批获得抗血清效价的高低。

血清中的每一种抗体都是由B细胞分泌的。如果能从脾脏中分离出B细胞并分别培养成细胞株,就可以获得一类只对一个表位有反应且具有高度特异性的抗体。如果培养大量的细胞系,就可以获得一定质量、纯度均匀的抗体,称为单克隆抗体。

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然而,B细胞在培养基中不能很好生长,虽然有人一直努力但结果均不甚理想,尽管人们努力寻找脾细胞在体外生长的条件,但效果不佳。

癌细胞生长不受控制,在培养基中容易生长。有许多已建立的癌细胞系的生长特性是众所周知的。如果将癌细胞的永久性生长特性引入通过细胞融合产生有用抗体的B细胞中,就可以获得B细胞系在培养基中的永久性生长,称为融合瘤细胞株。

常规需要2-3个月的克隆筛选,但莱德伯特(北京)生物科技有限公司的Beacon这款设备仅需5天,且保证了细胞株的高产量,轻松实现99.5%的单克隆性,从根本上降低了成本,且具有全程的图像记录和完善的报告,可以为后续的应用提供有力的证据。并且具有自动化操作,异体化的设计可以大大减少传统设备转换手动操作和系统误差,准确性和性价比极高。

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