由于对新生物资源需要、制备淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体，寻找远缘种间遗传物质交换的新途径，细胞融合技术已成为生命科学研究的热点之一。因此，细胞融合方法是细胞融合的关键。下面由莱德伯特（北京）生物科技有限公司为大家介绍一下细胞融合的常用方法。

一、仙台病毒法

仙台病毒分四个阶段诱导融合：

1、两个细胞一起生长，加入一种病毒，病毒在4摄氏度时附着在细胞膜上。使两个细胞相互结合。

2、在37摄氏度时，病毒与细胞膜发生反应，细胞膜被破坏。此时需要钙、镁离子，最适pH值为8.0-8.2。

3、细胞膜连接部穿透和周围连接部修复，需要钙离子和ATP。

4、融合成巨大细胞，仍需ATP。

病毒促进细胞融合的主要步骤如下：

1、两个原生质体或细胞在病毒粘附下彼此接近。

2、通过病毒与原生质体或细胞膜的相互作用，两种膜相互渗透，细胞质相互渗透。

3、两个原生质体的细胞核相互融合，两个细胞融合在一起。

4、进入正常细胞分裂途径，分裂成两种染色体的杂交细胞。

二、聚乙二醇（PEG）法

PEG诱导融合具有融合成本低、无需特殊设备等特点。融合子产生的异核率较高。融合过程与物种无关。缺点是融合过程复杂，PEG对细胞有毒性。

PEG的工作原理：由于PEG分子是微负的，它可以与水、蛋白质、带有正极性基因的碳水化合物形成H键，从而在质膜之间形成分子桥梁。其结果是细胞的质膜粘附，从而促进质膜的融合。此外，PEG可以增加细胞质膜的流动性，使细胞核与细胞器的融合成为可能。

三、电融合法

电融合是20世纪80年代出现的一种细胞融合技术，在直流脉冲的诱导下，细胞膜表面的氧化还原电位发生变化，使异种细胞结合，使质膜瞬间破裂，然后质膜开始连接，直到它闭合成一个完整的膜，形成融合体。

电融合具有融合率高、重复性强、对细胞损伤小等优点。装置巧妙，方法简单。融合过程可以在显微镜下或视频上观察。消除了PEG诱导后的洗涤过程，诱导过程具有很强的可控性。

电融合的基本过程是细胞膜接触。当原生质体被放置在低电导率的溶液中时，电场被通电，电流通过原生质体而不是通过溶液。结果是原生质体被电场极化，产生偶极子使它们紧密接触排列成串。当原生质体排列成串时，可以立即施加高频直流脉冲破坏质膜，使两个紧密接触的细胞融合。

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