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人单克隆抗体和基因抗体您了解多少？时间：2024-07-08 单克隆抗体是继疫苗和重组蛋白之后最重要的生物技术产品。他们处于21世纪生物技术和生物医学产业的战略高地。由于单克隆抗体已成功应用于癌症、自身免疫性疾病、传染病和移植排斥反应的治疗，经过三十几年的发展，单克隆抗体技术的发展经历了四个阶段：鼠源性、嵌合性、人源性和全人类单克隆抗体。让我们介绍一下莱德伯特（北京）生物科技有限公司的人类单克隆抗体和基因抗体。 1、人单克隆抗体 1.EB病毒转化技术：EB病毒类似疱疹病毒，用于体外感染人外周血淋巴细胞（来自淋巴结、扁桃体、脐血、外周血等），转化为永久性人B淋巴细胞系，在体外可分泌人抗体。 2.人鼠杂交瘤单克隆抗体：技术上与鼠杂交瘤相同。亲代骨髓瘤细胞主要来源于小鼠骨髓瘤653和NS-1、大鼠骨髓瘤y3ag1.2.3等，亲代B细胞来源于人外周血淋巴细胞、淋巴结细胞和脾细胞。然而，单克隆抗体在小鼠和人杂交瘤中的分泌并不稳定。在大多数情况下，杂交瘤细胞由于染色体丢失而失去分泌抗体的能力。 3.人杂交瘤单克隆抗体：人杂交瘤的制备方法与小鼠杂交瘤技术基本相同，利用人骨髓瘤细胞与人B淋巴细胞融合。然而，现有的人类骨髓瘤细胞类型非常有限。人骨髓瘤细胞与非分泌性骨髓瘤细胞的融合率仍低于小鼠骨髓瘤细胞。然而，人类的免疫力不同于小鼠。B淋巴细胞通常仅限于外周血，在不适合融合的状态下被激活。因此，对人杂交瘤细胞融合、融合后筛选和抗体分泌的研究并不理想。 4.转基因Ig基因小鼠的构建：将修饰后的人类抗体基因组导入小鼠胚胎，获得免疫后产生人类抗体的转基因小鼠。修饰抗体均为人类，但抗原识别和抗原结合位点的三个互补决定因素均为小鼠。
2、 基因工程抗体 基因工程抗体是获得人鼠嵌合抗体的方法、改良抗体、抗体片段、噬菌体抗体库技术、表位印迹选择技术等。 1.人鼠嵌合抗体：抗体重链和轻链的可变区（V区）与抗体源的识别有关，具有特异性，而恒定区（C区）与抗体功能有关。人和小鼠嵌合抗体设计为具有小鼠V区和人C区。修饰后的嵌合抗体保留了原鼠单克隆抗体的特异性和亲和力，人抗鼠抗体的反应也明显减弱。 2.修饰抗体：也称为CDR移植。人类抗体中相应的CDR位点被小鼠CDR（可变区互补抗原结合结构的抗原结合位点的一部分）取代，因此，除构成抗原结合位点的CDR外，所有抗体均来源于人类。这种抗体在体内的免疫力要低得多。 3.抗体片段：Fab抗体（抗体的y臂称为Fab，由可变区和一小部分恒定区组成）。利用基因工程方法构建了具有可变区和少量恒定区的Fab抗体。该抗体仍具有与抗原特异性结合的特点。单链抗体（重链可变区通过短肽连接到轻链可变区，使其分子更小，更有利于组织的通过和清除，易于构建和表达，但亲和力降低到一定程度）。 4.噬菌体抗体文献技术：建立与体内B细胞库相对应的抗体库，筛选所需抗体。通过PCR扩增重链和轻链cDNA，并将其插入噬菌体外壳蛋白基因中感染大肠杆菌。将抗体基因表达产物与外壳蛋白融合，展示在噬菌体表面形成噬菌体抗体。通过固相抗原筛选，将不能结合抗原的噬菌体洗掉，将能结合抗原的噬菌体洗脱，再感染细菌进行扩增。通过反复吸附、洗脱和扩增可获得所需的抗原特异性噬菌体抗原。这些抗体可能是人类的。 * 以上部分内容网上收集，仅供参考。如果本站文章涉及版权等问题，请及时与本站联系，我们会尽快处理！ |
